为什么采集微生物水样时,采样瓶内要留有三分之二空间
供化验用的水样必须有足够的代表性。从水样取出后，到分析结束之前，应尽量避免水中原有成分发生明显变化。避免外来污染，这是水质调查工作中十分重要的一环。如果所取水样没有代表性，或者成分已经发生了变化，后面的工作做得再好，也得不到正确的结果，有问题也不易查出来，因此必须注意水样的采集与保存。
一、采样计划
采样前应根据水质检验目的和任务制定采样计划，内容包括：采样目的、检验指标、采样时间、采样地点、采样方法、采样频率、采样数量、采样容器与清洗、采样体积、样品保存方法、样品标签、现场测定项目、采样质量控制、运输工具和条件等。
二、采样容器
1、应根据待测组分的特性选择合适的采样容器。
2、容器的材质应化学稳定性强，且不应与水样中组分发生反应，容器壁不应吸收或吸附待测组分。
3、采样容器应可适应环境温度的变化，抗震性能强。
4、采样容器的大小、形状和重量应适宜，能严密封口，并容易打开，且易清洗。
5、应尽量选用细口容器，容器的盖和塞的材料应与容器材料统一。在特殊情况下需用软木塞或橡胶塞时应用稳定的金属箔或聚乙烯薄膜包裹，最好有蜡封。有机物和某些微生物检测用的样品容器不能用橡胶塞，碱性的液体样品不能用玻璃塞。
6、对无机物、金属和放射性元素测定水样应使用有机材质的采样容器，如聚乙烯塑料容器等。
7、对有机物和微生物学指标测定水样应使用玻璃材质的采样容器。
8、特殊项目测定的水样可选用其他化学惰性材料材质的容器。如热敏物质应选用热吸收玻璃容器;温度高、压力大的样品或含痕量有机物的样品应选用不锈钢容器;生物(含藻类)样品应选用不透明的非活性玻璃容器，并存放阴暗处;光敏性物质应选用棕色或深色的容器。
三、采样容器的洗涤
1、测定一般理化指标采样容器的洗涤
将容器用水和洗涤剂清洗，除去灰尘、油垢后用自来水冲洗干净，然后用质量分数10%的硝酸(或盐酸)浸泡8h，取出沥干后用自来水冲洗3次，并用蒸馏水充分淋洗干净。
2、测定有机物指标采样容器的洗涤
用重铬酸钾洗液浸泡24 h，然后用自来水冲洗干净，用蒸馏水淋洗后置烘箱内180℃烘4h，冷却后再用纯化过的己烷、石油醚冲洗数次。
3、测定微生物学指标采样容器的洗涤和灭菌
(1)容器洗涤:将容器用自来水和洗涤剂洗涤，并用自来水彻底冲洗后用质量分数为10%的盐酸溶液浸泡过夜，然后依次用自来水，蒸馏水洗净。
(2)容器灭菌:热力灭菌是最可靠且普遍应用的方法。热力灭菌分干热和高压蒸气灭菌两种。干热灭菌要求160℃下维持2h;高压蒸气灭菌要求121℃下维持15 min，高压蒸汽灭菌后的容器如不立即使用，应于60℃将瓶内冷凝水烘干。灭菌后的容器应在2周内使用。
四、采样器
1、采样前应选择适宜的采样器。
2、塑料或玻璃材质的采样器及用于采样的橡胶管和乳胶管要洗净备用。
3、金属材质的采样器，应先用洗涤剂清除油垢，再用自来水冲洗干净后晾干备用。
4、特殊来样器的清洗方法可参照仪器说明书。
五、水样采集
1、一般要求
(1)理化指标
采样前应先用水样荡洗采样器、容器和塞子2～3次(油类除外)。
(2)微生物学指标
同一水源、同一时间采集几类检测指标的水样时，应先采集供微生物学指标检测的水样。采样时应直接采集，不得用水样测洗已灭菌的采样瓶，并避免手指和其他物品对瓶口的沾污。
(3)注意事项
a采样时不可搅动水底的沉积物。
b采集测定油类的水样时，应在水面至水面下300 mm采集柱状水样，全部用于测定。不能用采集的水样冲洗采样器(瓶)。
c采集测定溶解氧、生化需氧量和有机污染物的水样时应注满容器，上部不留空间，并采用水封。
d含有可沉降性固体(如泥沙等)的水样，应分离除去沉积物。分离方法为:将所采水样摇匀后倒人筒形玻璃容器(如量筒)，静置30 min，将已不含沉降性固体但含有悬浮性固体的水样移人采样容器并加人保存剂。测定总悬浮物和油类的水样除外。需要分别测定悬浮物和水中所含组分时，应在现场将水样经0. 45µm膜过滤后，分别加人固定剂保存。
e测定油类、BOD5、硫化物、微生物学、放射性等项目要单独采样。
f完成现场测定的水样，不能带回实验室供其他指标测定使用。
微生物采样器的微生物采样器的使用原理
撞击器是6层有微小孔眼的铝合金圆盘。圆盘下放琼脂平皿，每圆盘间有密封胶圈，在通过三个弹簧挂钩把圆盘牢固地联在一起。每个圆盘上有400个成环行排列、逐层减小，标准采样流量为1立方呎（28.3L/min）。当含有微生物粒子的气流进入最上层的采样口后，由于气流的逐层增高，不同大小的微生物离子按空气动力学特征分别撞击在相应的琼脂表面上。捕获在各级上的粒子大小范围是由该级孔眼的气流速度和上一级的粒子截阻率而决定的。第一、二级类似人的上呼吸道捕获的粒子，第3-6级类似人的下呼吸道捕获的粒子，这就相当程度上复制了这些粒子在呼吸道的穿透作用和沉着部位。六级空气微生物采样器可以提供加装好普通营养琼脂的平皿。
空气微生物的采样
100多年来，研究者设计了多种多样的采样器，归纳起来可分为五类，即惯性撞击类、过滤阻留类、静电沉着类、温差迫降类和生物采样类。 1自然沉降法。它是利用空气微生物粒子的重力作用，在一定的时间内，让所处区域的空气中微生物颗粒逐步沉降到带有培养介质的平皿内的一种采样方法。自然沉降法粗糙，不能测定空气流量和悬浮在空气中的小粒子上的细菌，但对于那些因菌粒子沉着而致的污染，例如伤口的污染仍有一定的价值。
2射流撞击式采样器(裂隙式采样器)。这是当今微生物采样器中应用最广泛、品种最多的一类采样器。它是利用各种抽气装置，以每分钟恒定气流量，使空气通过狭小喷嘴，以便空气和悬浮于其中的微生物粒子形成高速气流，在离开喷嘴时气流射向采集面，气体沿采集面拐弯而去，而颗粒则按惯性继续直线前进，撞击并粘附于采集面上，从而被捕获。这类采样器能作空气微生物的定量测定。按其所用的撞击面不同，又分为固体撞击式采样器和液体撞击式采样器两种。
3离心撞击式采样器离心撞击式采样器是利用气体在旋转径路中运动时所产生的离心力，使粒子获得一定动量，并因其惯性而偏离气体流线，撞击沉着在附近的采集面上。生物类采样器即用敏感的动物和植物来进行空气微生物的检测。
微生物采样器的工作原理
六级筛孔撞击式空气微生物采样器除了能够测定空气微生物的数量之外，它独有的特性还能测出这些粒子的大小，而后者是判定空气微生物危害的重要指标之一。它是由六个撞击器组合成一体，每一级实际是一个单级采样器，利用6次反复撞击原理，绝大部分粒子特别是在气管及肺沉降的粒子基本都撞击下来，因而它采集到的粒子大小范围自然比单级的广，这是一些单级撞击采样器所无法比拟的，而且采样器的圆形喷口比裂隙等喷口有更高的采样效率。采样时相对湿度逐级地增高（由第一级的39%增至第六级的88%），这十分有利于脆弱的病原微生物，特别是病毒粒子的存活。由于它这些与众不同的特点，使它广泛而有效地应用于空气微生物的监测，自问世以来常用不衰。被专家推荐为国际标准采样器。六级空气微生物采样器模拟人呼吸道的解剖结构和空气动力学生理特征，采样惯性撞击原理而将悬浮在空气中的微生物粒子分等级地收集到采样介质表面上，然后供培养及微生物学分析。